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為什麽要進行細胞鑒定?

  • 發布日期:2021-01-26      瀏覽次數:1114
    •   為什麽要進行細胞鑒定?
        1.什麽是細胞係鑒定?
        所謂細胞係鑒定即通過STR(短串聯重複)圖譜所建立細胞係的遺傳特征。一株細胞係的遺傳特征確立後,細胞係可以通過定期的檢測,以防止出現細胞係被誤認或交叉汙染的情況。
        2.為什麽要進行細胞係鑒定?
        首先進行細胞係STR鑒定是很重要的。很多生物醫藥的研究都采用培養細胞來進行,這些細胞可能是受贈於其它研究人員,也可能是從細胞庫(如美國ATCC,AmericanTypeCultureCollection)得來。據估計,15-20%的實驗室,實驗中所使用的細胞已經不是原來的細胞係,或者與其它細胞係發生了交叉汙染。顯然,細胞係遭到汙染、特征鑒別錯誤,將會極大的威脅著基於這些細胞而發表的論文質量和研究發現的正確性。為此,很多細胞庫現在都要對提交來的細胞係進行鑒定,並對細胞係之間的交叉汙染進行監測。
        現在很多機構都已經認識到這個的重要性,ATCC和FDA,這些機構要求對用於製藥領域的實驗中所使用的材料—諸如細胞係—應該進行“身份鑒定”和純度測試。很多雜誌也要求使用細胞係的文章提供STR指紋圖譜數據。
        FDA建議研究人員在培養細胞的較早階段(細胞培養第一周)來鑒定細胞係的身份。細胞在被凍存前應再一次進行鑒定;對於活躍生長的細胞,每兩個月應鑒定一次;文獻發表前也應對細胞係身份進行鑒定。
        如果一個實驗室使用不止一種細胞係,則應在實驗開始時,就要對所有的細胞係進行鑒定,以便排除交叉汙染。
        這樣將減少由於細胞係發生交叉汙染或身份誤認,將導致實驗數據的無效或數據誤導。
        3.如何進行細胞係鑒定?
        細胞係鑒定目前主要基於身份認證委員會的標準。依據該標準,可以通過多重熒光PCR技術,對人源8個STR位點以及1個性別決定位點進行檢測。
        4.什麽時候需細胞係鑒定?
        1)當建立或獲得一個新的細胞係時;
        2)一個涉及到細胞試驗項目開始/結束時;
        3)在細胞凍存之前,或細胞已連續培養2~3個月時;
        4)發表文章或申請課題經費前;
        5)細胞係表現不穩定或結果與預期差別較大時;
        6)當實驗室使用超過一種細胞係時,所有細胞係先鑒定以排除交叉汙染的可能。