細胞係鑒定錯誤的根源 大部分的細胞係在學術環境中被建立,在學術環境下,組織培養通常被認為是一種對技能少有要求的技術,其所用到的必要設備如流動櫃和孵育箱使用起來沒什麽限製。在這些情況下,嚐試建立一種新的細胞係通常會導致交叉汙染是不足為怪的。在送至德國的微生物和細胞培養收藏所的550個個白血病和淋巴瘤細胞係中,59/395(15%)被初創者送來的細胞係以及23/155(15%)的二級來源是錯誤的。可以推測大部分二級來源的細胞係已被交叉汙染或被初創者錯誤鑒定。
有許多緣由可以引起細胞培養物錯誤鑒定,每一個實驗室都存在風險。或許細胞錯誤鑒定zui直接的原因就是在常規操作過程中對細胞培養容器進行了錯誤標記。造成這種問題出現的原因有:實驗員的工作負荷、缺乏注意以及在細胞操作過程中的分心。
培養物的交叉汙染以及隨後汙染細胞的過量生長是另一個引起細胞係錯誤鑒定的常見原因。這種情況發生的幾率在以下條件會增加:試劑的共用、在再喂養操作時反複使用相同的試管、在沒有充分分離每一細胞類型情況下同時對多個培養物進行操作。當交叉汙染發生時,一種細胞類型迅速生長而超過另一種,在4-5次細胞傳代後,一個純的汙染細胞培養物將會形成。
在使用其它物種的滋養層(例如小鼠3T3細胞)來繁殖人類幹細胞或原始細胞時有意地共培養會導致交叉汙染或人類細胞係過生長。正常情況下,滋養層細胞處於無增殖狀態,但隻要生長抑製程序不*,它就會不斷繁殖並逐步取代人類細胞。體細胞雜交雖不常見但也會發生,如人類套細胞淋巴瘤細胞係NCEB-1就攜帶了小鼠的七條染色體。
異種移植也會導致細胞係交叉汙染和錯誤鑒定,來自異種移植的複蘇細胞會被宿主動物細胞所替代。
一般而言,交叉汙染zui終的結果將會是少量適應細胞*且快速的替代。兩個細胞係不能持續共存於同一個培養環境,除非它們是共生關係,但這種情況據我們所知還未有報道。一個細胞群經過許多次傳代後還能包含一個穩定的混合基因組,*已知的情況是接續的體細胞雜交。
簡單、經濟的質控措施能夠阻止或至少會減少細胞錯誤鑒定的發生。由於缺乏重視及未采用質控措施導致細胞錯誤鑒定現象極其普遍。大量質控措施的實行以及相應文件的適當調整被認為是生物製藥領域出現相對較低細胞錯誤鑒定報道的因素。