DNA抽提和純化方法介紹:
一、酚抽提法:先用蛋酶K、SDS破碎細胞,消化蛋白,然後用酚和酚-氯DNA大小為(wei) 100-150kb
二、甲酰胺解聚法:破碎細胞同上,然後用高濃度甲酰胺解聚蛋白質與(yu) DNA的結合,再透析獲得DNA可得DNA200kb左右。
三、玻璃棒纏繞法:用鹽酸胍裂解細胞,將裂解物鋪於(yu) 乙醇上,然後用帶鉤或U型玻璃棒在界麵輕攪,DAN沉澱液繞於(yu) 玻棒。生成DNA約80kb。
四、異丙醇沉澱法:基本同1法,僅(jin) 用二倍容積異丙醇替代乙醇,可去除小分子RNA(在異丙醇中可溶狀態)
五、表麵活性劑快速製備法:用Triton X-100A或NP40表麵活性劑破碎細胞,然後用蛋白酶K或酚去除蛋白,乙醇沉澱或透析。
六、加熱法快速製備:加熱96℃-100℃,五分鍾,然後離心後取上清,可用於(yu) PCR反應。
七、堿變性快速製備:先用NaOH作用20分鍾,再加HCI中和,離心後取上清,含少量DNA。