多糖多酚植物總RNA快速提取試劑盒(離心柱型)
下載說明書(shu)
產(chan) 品編號 | 包裝 | 價(jia) 格 |
RP3201 | 20次 | 詢價(jia) |
RP3202 | 50次 | 詢價(jia) |
試劑盒組成:
試劑盒組成 | 保存 | 20次(RP1201) | 50次 (RP1202) |
裂解液RL | 4℃避光 | 25 ml | 55 ml |
沉澱劑A | 室溫 | 2 ml | 4 ml |
去蛋白液RE | 室溫 | 15ml | 30ml |
漂洗液RD | 室溫 | 20ml | 40ml |
漂洗液RW | 4℃(一個(ge) 月) | 6 ml | 15 ml |
*次使用前按說明加量乙醇 | |||
RNase-free H2O | 室溫 | 5 ml | 10ml |
70%乙醇 | 室溫 | 4ml RNase-free H2O | 9ml RNase-free H2O |
*次使用前按說明加量乙醇 | |||
RNase-free 吸附柱RA | 室溫 | 20個(ge) | 50個(ge) |
收集管(2ml) | 室溫 | 20個(ge) | 50個(ge) |
產(chan) 品說明:
改進的異硫氰酸胍/酚一步法裂解細胞和滅活RNA 酶, 然後總RNA在高離序鹽狀態下選擇性吸附於(yu) 離心柱內(nei) 矽基質膜, 再通過一係列快速的漂洗-離心的步驟, 去蛋白液和漂洗液將細胞代謝物、蛋白等雜質去除, zui後低鹽的RNase free water將純淨RNA從(cong) 矽基質膜上洗脫。
植物組織RNA提取的難點
1、酚類化合物的幹擾
許多植物組織特別是植物的果實和樹木類植物中富含酚類化合物。酚類物質的含量會(hui) 隨著植物的生長而增加。因而從(cong) 幼嫩的植物材料中更容易提取RNA。此外,針葉類植物的針葉中多酚的含量比在落葉植物的葉子中要高得多。在植物材料勻漿時,酚類物質會(hui) 釋放出來,氧化後使勻漿液變為(wei) 褐色,並隨氧化程度的增加而加深,這一現象被稱為(wei) 褐化效應(brownins effect)。被氧化的酚類化合物(如醌類)能與(yu) RNA穩定地結合,從(cong) 而影影響RNA的分離純化。
2、多糖的幹擾
多糖的汙染是提取植物RNA時常遇到的另一個(ge) 棘手的問題.,植物組織中往往富含多糖,而多糖的許多理化性質與(yu) RNA很相似,因此很難將它們(men) 分開。在去除多糖的同時RNA也被裹攜走了,造成RNA產(chan) 量的減少:而在沉澱RNA
時,也產(chan) 生多糖的凝膠狀沉澱,這種含有多糖的RNA沉澱難溶於(yu) 水,或溶解後產(chan) 生粘稠狀的溶液。由於(yu) 多糖可以抑製許多酶的活性,因此汙染了多糖的RNA樣品無法用於(yu) 進一步的分子生物學研究。
3、蛋白雜質的影響
蛋白質是汙染RNA樣品的又一個(ge) 重要因素。由幹RNase和多酚氧化酶亦屬於(yu) 蛋白質,因而要獲得完整的、高質量的RNA就必須有效地去除蛋白雜質。
4、次級代謝產(chan) 物的影響
從(cong) 植物組織中提取高質量RNA的另一個(ge) 難點是許多高等植物組織尤其是成熟組織能產(chan) 生某些水溶性的次級代謝產(chan) 物,這些次級代謝產(chan) 物很容易與(yu) RNA結合並與(yu) RNA共同被抽提出來而阻礙具有生物活性的RNA的分離。
試劑盒特點:
◆ 快速去除多糖,上樣孔無多糖汙染:
◆ *多酚沉澱劑,防多酚氧化同時沉澱多酚:
◆ *漂洗液RD,特異性洗掉基因組,確保得到的RNA無基因組汙染:
◆ 成功提取進口TRIzol及Q公司試劑盒無法很好提取的多種植物RNA,包括仙人掌、仙人球、蘆薈、鳳梨、水仙、黃瓜、辣椒、胡蘿卜、玉米、大豆、百合、小麥、西紅柿、花菜、油菜籽等;
提取範圍:
仙人掌、仙人球、水仙、黃瓜、胡蘿卜、辣椒、西紅柿、煙草、玉米、大豆、百合、小麥、擬南芥和其他大多數植物。
產(chan) 量:
每100mg組織10~50μg不等