是既是培養(yang) 細胞中供給細胞營養(yang) 和促使細胞生殖增殖的基礎物質,也是培養(yang) 細胞生長和繁殖的生存環境。培養(yang) 基的種類很多,按其物質狀態分為(wei) 半固體(ti) 培養(yang) 基和液體(ti) 培養(yang) 基兩(liang) 類;按其來源分為(wei) 合成培養(yang) 基和天然培養(yang) 基。
(1):合成培養(yang) 基是根據細胞所需物質的種類和數量嚴(yan) 格配製而成的。內(nei) 含碳水化合物、氨基酸、脂類、無機鹽、維生素、微量無素和細胞生長因子等。單獨使用細胞雖有生存但不能很好的生長增殖。
(2):使用zui普遍的天然培養(yang) 基是血清,基本以小牛血清zui普遍。血清由於(yu) 含有多種細胞生長因子、促貼附因子及其多活性物質。與(yu) 合誌培養(yang) 基合用,能使細胞碩利增殖生長。常見使用zui為(wei) 5-20%。
下麵介紹一些常用培養(yang) 基以及特性
1、RPMI-1640 Medium
RPMI-1640廣泛應用於(yu) 哺乳動物、特殊造血細胞、正常或惡性增生的白細胞,雜交瘤細胞的培養(yang) ,是目前應用十分廣泛的培養(yang) 基。主要用於(yu) 懸浮細胞培養(yang) 。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴細胞、T細胞淋巴瘤細胞以及HCT-15上皮細胞等均可參考使用。
2、Minimum Essential Medium(MEM)
也稱zui低必需培養(yang) 基,它僅(jin) 含有12種必需氨基酸、穀氨酰胺和8種維生素。成分簡單,可廣泛適應各種已建成細胞係和不同地方的哺乳動物細胞類型的培養(yang) 。MEM-Alpha一般用於(yu) 培養(yang) 一些難培養(yang) 細胞類型,而其它沒有特殊之處的細胞株則幾乎均可采用MEM來培養(yang) 。
3、DMEM-高糖(標準型)
是一種應用十分廣泛的培養(yang) 基,可用於(yu) 許多哺乳動物細胞培養(yang) ,更適合高密度懸浮細胞培養(yang) 。適用於(yu) 附著性較差,但又不希望它脫離原來生長點的克隆培養(yang) ,也可用於(yu) 雜交瘤中骨髓瘤細胞和DNA轉染的轉化細胞的培養(yang) 。
4、DMEM-低糖(標準型)
是一種應用十分廣泛的培養(yang) 基,可用於(yu) 許多哺乳動物細胞培養(yang) 。低糖適於(yu) 依賴性貼壁細胞培養(yang) ,特別適用於(yu) 生長速度快、附著性較差的腫瘤細胞培養(yang) 。
5、DMEM/F12
DMEM/F12培養(yang) 基適於(yu) 克隆密度的培養(yang) 。F12培養(yang) 基成分複雜,含有多種微量元素,和DMEM以1:1結合,稱為(wei) DMEM/F12培養(yang) 基(DME/F12medium),作為(wei) 開發無血清配方的基礎,以利用F12含有較豐(feng) 富的成分和DMEM含有較高濃度的營養(yang) 成分為(wei) 優(you) 點。該培養(yang) 基適用於(yu) 血清含量較低條件下哺乳動物細胞培養(yang) 。為(wei) 了增強該培養(yang) 基的緩衝(chong) 能力,改良之一是在DMEM/F12(1:1)中加入15mMHEPES緩衝(chong) 液。
6、McCoy’s
McCoy’s Medium 主要為(wei) 肉瘤細胞的培養(yang) 所設計,可支持多種(如骨髓、皮膚、肺和脾髒等)的原代移植物的生長,除適於(yu) 一般的原代細胞培養(yang) 外,主要用於(yu) 作組織活檢培養(yang) 、一些淋巴細胞培養(yang) 以及一些難培養(yang) 細胞的生長支持。例如Jensen大鼠肉瘤成纖維細胞、人淋巴細胞、HT-29、BHL-100等上皮細胞。
7、Iscove’s Modified Dulbecco Medium (IMDM)
Guilber 和Iscove將Dulbecco’Medium 改良為(wei) Iscove’s Medium,用於(yu) 培養(yang) 紅細胞和巨噬細胞前體(ti) 。此種培養(yang) 液含有硒、額外的氨基酸和維生素、丙酮酸鈉和HEPES。並用硝酸鉀取代了硝酸鐵。IMDM還能夠促進小鼠B淋巴細胞,LPS刺激的B細胞,骨髓造血細胞,T細胞和淋巴瘤細胞的生長。IMDM為(wei) 營養(yang) 非常豐(feng) 富的培養(yang) 液,因此可以用於(yu) 高密度細胞的快速增殖培養(yang) 。
8、M-199 Medium
1950年,Morgan成功研製出具有確定化學成分的細胞培養(yang) 液,即M-199,主要用於(yu) 雞胚成纖維細胞培養(yang) 。此培養(yang) 液必須輔以血清才能支持長期培養(yang) 。M-199可用於(yu) 培養(yang) 多種種屬來源的細胞,並能培養(yang) 轉染的細胞。
9、Leibovitz Medium (L-15)
L-15培養(yang) 液適用於(yu) 快速增殖瘤細胞的培養(yang) ,用於(yu) 在CO2缺乏的情況下培養(yang) 腫瘤細胞株。此培養(yang) 液采用磷酸鹽緩衝(chong) 體(ti) 係,氨基酸組成進一步改良,並由半乳糖替代了葡萄糖。
10、Ham’s F-10培養(yang) 基:適應小鼠細胞、人類二倍體(ti) 的培養(yang) 。
11、Ham’s F-12培養(yang) 基:可以在加入很少血清的情況下應用,特別適合單細胞培養(yang) 和克隆化培養(yang) ,是無血清培養(yang) 中常用的基礎培養(yang) 液。
12、William’s Medium E:用於(yu) 大鼠肝上皮細胞的長期細胞培養(yang) 。
13、MCDB 131 培養(yang) 液:用於(yu) 培養(yang) 內(nei) 皮細胞。
14、Opti-MEM I Reduced Serum Media:用於(yu) 培養(yang) 造血細胞。
15、植物血凝素(PHA):增加細胞轉化和DNA合成。